純化水微生物限度檢查，純化水微生物檢測薄膜過濾法

生物
2023-06-01

目錄
純化水微生物檢測方法
初始污染菌在藥典哪一部
純化水微生物檢測
純化水微生物限度檢查薄膜過濾法
純化水取樣方法

純化水微生物檢測方法

1檢測前的準(zhǔn)備

1.1儀器：微生行兆物限度檢驗儀

微生物限度培養(yǎng)器

1.2培養(yǎng)基：TGYA瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂培養(yǎng)基

上述培養(yǎng)基均須做培養(yǎng)基的促生長試驗，TGYA瓊脂培養(yǎng)基的促生長試驗參見微生物計數(shù)操作檢查法SOP07-QC-3-017，R2A瓊脂培養(yǎng)基促生長試驗中選擇的菌種是銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄糖球菌，操作方法同微生物計數(shù)操作檢查法SOP07-QC-3-017中培養(yǎng)基的促生長試驗。

75%的酒精

1.3開啟凈化工作臺，把微生物限度檢驗儀連接電源。

2檢測

2.1薄膜過濾法

使用孔徑大小不超過0.45μm的薄膜過濾器。

2.2在凈化工作臺下，用火焰噴槍對泵頭端面和過濾片進行消毒。把微生物限度培養(yǎng)器固定在微生物限度檢驗儀上，打開微生物限度培養(yǎng)器蓋子。

2.3取50ml的純化水，倒入微生物限度培養(yǎng)器中，打開微生物限度檢驗儀開關(guān)，立即過濾。過濾完成后，取下過濾器，檔升租在過濾器膜的另一面中，笑攔傾注TGYA瓊脂培養(yǎng)基，蓋上蓋子。

2.4取50ml的純化水，倒入微生物限度培養(yǎng)器中，打開微生物限度檢驗儀開關(guān)，立即過濾。過濾完成后，取下過濾器，在過濾器膜的另一面中，傾注R2A瓊脂培養(yǎng)基，蓋上蓋子。

2.5每個樣品過濾后均做2單個培養(yǎng)，檢測完畢，取一微生物限度培養(yǎng)器固定在微生物限度檢驗儀上，注入100ml的75%酒精過濾，關(guān)閉儀器、電源。

3培養(yǎng)

傾注TGYA瓊脂培養(yǎng)基的，在30℃-35℃培養(yǎng)48h-72h，并計數(shù)。傾注R2A瓊脂培養(yǎng)基的，在20℃-25℃培養(yǎng)5d-7d，并計數(shù)。

分別計算和報告兩種培養(yǎng)基每1ml純化水中的cfu值。

初始污染菌在藥典哪一部

4.10微生物限度(薄膜過濾法)

4.10.1取相當(dāng)于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數(shù)較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖芹擾洗方法和沖洗量同“計數(shù)方法的驗證”。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。

4.10.2陰性對照試驗取試驗用的稀釋液1ml，照上述戚首塵薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。

4.10.3培養(yǎng)和計數(shù)除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)48小時，逐日點計菌落數(shù)，一般以48小時的菌落數(shù)報告；霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時，逐日點計菌落數(shù)，一般以72小時高禪的菌落數(shù)報告；必要時，可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間至5～7天進行菌落計數(shù)并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數(shù)。點計菌落數(shù)后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報告規(guī)則報告菌數(shù)。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數(shù)不少于15，則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。

4.10.4菌數(shù)報告原則以相當(dāng)于1g或1ml供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。

這是我們公司的純化水微生物檢測部分內(nèi)容，請參考。

純化水微生物檢測

在醫(yī)藥的生產(chǎn)過程中，純化水的質(zhì)量是關(guān)系到藥品質(zhì)量的一個首要原因。純化水在生產(chǎn)，儲存和運輸?shù)倪^程中，非常容易受到微生物的污染，因此對于水質(zhì)的日常檢測是質(zhì)量部門一個重要工作。對于純化水微生物限度檢查，各國所使用的方法不外乎與培養(yǎng)基澆注法，涂布法，膜過濾法，以及最大可能數(shù)法，最大的區(qū)別在于所使用的培養(yǎng)基不同。

我總結(jié)了以下對于純化水微生物限度檢查方法，同時我司熟悉純化水檢測相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和檢測項目要求，可提供專業(yè)、可靠的純化水檢測服務(wù)，出具國家認(rèn)可的純化水微生物限度檢查報告。cma資質(zhì)認(rèn)證如下：

對于活力比較強的微生物，在高營養(yǎng)性培養(yǎng)基上可以快速大量的生長，而對于活力比較差的微生物，生長速度會比較緩慢。在日常生活中，這兩種微生物經(jīng)常會同時出現(xiàn)由由于它們的生長速率不同，會產(chǎn)生無法完全檢出的現(xiàn)象，因此高營養(yǎng)性培養(yǎng)基和低營養(yǎng)性培養(yǎng)基常常會同時使用來提高微生物的檢出率，

培養(yǎng)的溫度和時間同樣是影響檢測的條件，高營養(yǎng)性培養(yǎng)基通常在30-35℃培養(yǎng)48-72小時，但是在同一個中，培養(yǎng)的時間越長，可以檢出的微生物數(shù)量就越多，低營養(yǎng)性培養(yǎng)基就在這時候亮逗被設(shè)計出來，有些培養(yǎng)基的培養(yǎng)時間甚至達到14天，可以至大化的復(fù)蘇低營養(yǎng)性微生物及受損傷的微生物。但是檢測周期的延長，對于工作效率來說，是很不利的，因此我們需要一個既能保證效率，又能保證檢出率的辦法。

在比較了中國藥典，美國藥典中所記載的方法，中國藥典中純化水微生物檢查所用到的培養(yǎng)基是 R2A 瓊脂培養(yǎng)基，在30-35℃培養(yǎng)大于5天逗跡。美國藥典中對于純化水的微生物檢測用何種培養(yǎng)基沒有做強制性規(guī)定，只要求在水確認(rèn)驗證及周期性確認(rèn)驗證時，使用適當(dāng)?shù)姆椒▽λ械奈⑸镒龀鲈u價即可。

《中國藥典》2010版、2015版以及2020版純化水微生物限度檢查中表示，生產(chǎn)企業(yè)必須確保純化水的質(zhì)量符合藥典要求，但藥典對于純化水的規(guī)定其實也只是至低水平，滿足了藥典的標(biāo)準(zhǔn)不一定就能保證符合企業(yè)預(yù)期用途的要求。因此，開展純化水微生物限度檢查直接影響到生產(chǎn)產(chǎn)品的安全質(zhì)量，中科檢測具有純化水微生物限度核查檢測，具有獨立山鍵并實驗室，報告具有CMA和CNAS資質(zhì)。