中字幕视频在线永久在线观看免费,亚洲av色香蕉一区二区蜜桃小说 ,亚洲精品中文字幕无码蜜桃,亚洲av无码一区二区三区在线播放,亚洲国产日韩a综合在线

當(dāng)前位置: 首頁 > 學(xué)科分類 > 化學(xué)

化學(xué)方法合成目的基因,合成目的基因的原料

  • 化學(xué)
  • 2025-02-12

化學(xué)方法合成目的基因?1. 反轉(zhuǎn)錄法:此方法利用目的基因轉(zhuǎn)錄形成的信使RNA(mRNA)作為模板,通過反轉(zhuǎn)錄酶的作用,合成與mRNA互補的單鏈DNA,進而通過酶促反應(yīng)生成雙鏈DNA,從而獲得所需的基因序列。2. 化學(xué)合成法:此方法基于已知的蛋白質(zhì)氨基酸序列,推斷出相應(yīng)的信使RNA序列,并依據(jù)堿基互補配對原則,那么,化學(xué)方法合成目的基因?一起來了解一下吧。

獲取基因的途徑有哪些

一.磷酸二酯法

磷酸二酯法的基本原理是,將二個分別在5′-或3′-末端帶有適當(dāng)保護基的脫氧單核苷酸連接起來,形成一個帶有磷酸二酯鍵的脫氧二核苷酸。

DNA合成所采用的出發(fā)原料是脫氧核苷酸或脫氧單核苷酸;它們都是多功能團的化合物。必須將不參加反應(yīng)的基團用適當(dāng)?shù)谋Wo基因選擇性地保護起來。這樣,具5′保護的單核苷酸,便能夠通過它的3′-OH

同另一個具有3′保護的單核苷酸的5′-P之間定向地形成一個二酯鍵,從而使它們縮合成兩端均被保護的二核苷酸分子。實驗中使用的各種不同的保護基團,有些可以通過酸處理移去,有些則可以用堿處理移去。一端脫保護的二核苷酸分子,如帶5′保護的二核苷酸分子,又能夠同另一個帶3′-保護的單核苷酸分子進行第二次縮合反應(yīng),形成一個三核甘酸分子。這樣從縮合反應(yīng)開始,到保護基團的消除,再進行新一輪縮合反應(yīng)。如此反復(fù)進行多次,直到獲得所需長度的寡聚脫氧核苷酸為止。

二.亞磷酸三酯法

原理是將所要合成的寡聚核苷酸鏈的3′-末端先以3′-OH與一個不溶性載體,如多孔玻璃珠(CPG)連接,然后依次從3′-5′的方向?qū)⒑塑账釂误w加上去,所使用的核苷酸單體的活性官能團都是經(jīng)過保護的。

三.寡核苷酸連接法

化學(xué)合成寡聚核苷酸片段的能力一般局限于150~200bp,而絕大多基因的大小超過了這個范圍,因此,需要將寡核苷酸適當(dāng)連接組裝成完整的基因。

人工合成目的基因的方法

使用DNA合成儀合成DNA不需要模板,原因是體外合成DNA是一種化學(xué)合成過程,類似于是從無到有的合成過程。整個合成步驟共分為4步驟:脫保護-偶聯(lián)-加帽-氧化。合成過程中需要使用合成原料:(1)4種合成單體:AGCU;(2)合成試劑:脫保護劑、活化劑、蓋帽劑、氧化劑以及符合質(zhì)量的乙腈等;(3)合成載體,如CPG。

基因合成

1、最短的基因的長度都很長,無法一次性合成的。

2、化學(xué)合成N條短鏈,轉(zhuǎn)入合適質(zhì)粒后再轉(zhuǎn)入大腸桿菌。用分子雜交方法合成。

3、工程量超大,成本超高,因此現(xiàn)階段都是通過從生物基因組中敲出。

目的基因的制備方法有哪些

人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。反轉(zhuǎn)錄法是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需要的基因;化學(xué)合成法是根據(jù)已知的蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推測出相應(yīng)的信使RNA序列,然后按照堿基互補配對原則,推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列,再通過化學(xué)的方法,以單核苷酸為原料合成目的基因。如人的血紅蛋白基因、胰島素基因等就可以通過人工合成基因的方法獲得。

全基因合成的實驗步驟

【答案】:獲取目的基因的途徑或來源如下。①化學(xué)合成法:如果已知某種基因的核苷酸序列,或根據(jù)某種基因產(chǎn)物的氨基酸序列,推導(dǎo)出編碼該多肽鏈的核苷酸序列,則可以利用DNA合成儀合成目的基因。②構(gòu)建基因組DNA文庫并從中篩選。③構(gòu)建cDNA文庫并從中篩選。④采用聚合酶鏈反應(yīng)獲取目的基因。

以上就是化學(xué)方法合成目的基因的全部內(nèi)容,1. 反轉(zhuǎn)錄法:此方法利用目的基因產(chǎn)生的信使RNA(mRNA)作為模板,通過反轉(zhuǎn)錄酶的作用,合成與mRNA互補的單鏈DNA。隨后,通過酶促反應(yīng)生成雙鏈DNA,從而獲得所需的基因片段。2. 化學(xué)合成法:此方法基于已知的蛋白質(zhì)氨基酸序列,推斷出相應(yīng)的信使RNA序列。依照堿基互補配對原則,內(nèi)容來源于互聯(lián)網(wǎng),信息真?zhèn)涡枳孕斜鎰e。如有侵權(quán)請聯(lián)系刪除。

猜你喜歡