微生物菌種鑒定，微生物對人類危害的影響

生物
2023-09-27

微生物菌種鑒定？【答案】：對于一株未知的細菌，首先要用經(jīng)典鑒定指標進行鑒定，包括形態(tài)、生理生化反應、生態(tài)特性、生活史、血清學反應以及對噬菌體的敏感性等。接著需要用現(xiàn)代的微生物學鑒定技術(shù)包括(G+C)mol%值法、核酸分子雜交法、那么，微生物菌種鑒定？一起來了解一下吧。

菌種簽定的主要方片

注射用水微生物超標要做菌種鑒定

傳統(tǒng)方法細菌做革蘭氏染色運動性試驗各種代謝然后查伯杰氏細菌手冊；用分子做的話提總DNA，pcr擴增16srDNA全長片段，上NCBI數(shù)據(jù)庫比對，選擇近緣序列構(gòu)建發(fā)育樹鑒定。

真菌的話主要根據(jù)形余鄭態(tài)，特別是有性型生殖形態(tài)鑒定；分子的話一般擴增ITS區(qū)域，比對，建樹鑒定。

首先你要確定待鑒定的菌種一定是純種。如果菌種不純，所觀察到的現(xiàn)象則是混合現(xiàn)象，這樣自然不會得到正確的結(jié)果。因此在鑒定之前，首先要將菌種純化。純化方法，一般有2種：平板劃線單菌落分離法和單細胞分離法。前一種操作簡便，效果良好，適用范圍廣。

菌種鑒定的方法一般有常規(guī)鑒定和分子生物學方法：

（1）常規(guī)鑒定：菌落形態(tài)觀察、革蘭氏染色、菌毛染色、糖類分解實驗、吲哚實驗、淀粉水解實驗、V-P實驗、甲寬吵基紅實驗、檸檬酸鹽利用實驗、硝酸鹽還原實驗、接觸酶實驗等

（2）分子生物學方法：細菌16SrDNA菌種鑒定：提取DNA，特定引物PCR擴增，PCR產(chǎn)物純化測序，進化樹豎巧頌分析；真菌18S rDNA/ITS菌種鑒定流程也是一樣的。

菌種短期保存和長期保存

“+”代表陽性；“-”代表陰性。跟醫(yī)院里的診斷結(jié)果一個意思

"G+"代表革蘭氏陽簡仔燃性；"G-"代表革蘭氏陰性戚仔。

是兩組不同的概攔虛念，要區(qū)分概念。

為什么要進行菌種鑒定

實驗步驟：菌種鑒定工作是各類微生物學實驗室都經(jīng)常遇到的基礎性工作。不論鑒定對象屬哪一類，其工作步驟都離不開以下三步：①獲得該微生物的純種培養(yǎng)物；②測定一系例必要的鑒定指標；③查找權(quán)威性的鑒定手冊。一、經(jīng)典分類鑒定方法群體：菌落形態(tài)，在半固體或液體培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)等

* 形態(tài)個體：細胞形態(tài)，染色反應，各種特殊構(gòu)造等

*營養(yǎng)要求：能源，碳源，氮源，生長因子等

*生理、生化反應酶；產(chǎn)酶種類和反應物性等

* 代謝產(chǎn)物：種橡灶類，產(chǎn)量，顯色嘩如如反應等

* 經(jīng)典指標生態(tài)特性：生長溫度，對氧的需要，宿主種類等

* 生活史特點

* 血清學反應

* 噬菌體的敏感性

* 其它

經(jīng)典分類法

經(jīng)典分類法是一百多年來進行微生物分類的傳統(tǒng)方法。其特點是人為地選擇幾種形態(tài)生理生化特征進行分類，并在分類中將表型特征分為主、次。一般在科以上分類單位以形態(tài)特征、科以下分類單位以形態(tài)結(jié)合生理生化特征加以區(qū)分。 * A. 能在 60 o C 以上生長

* B. 細胞大，寬度 1.3~1.8mm ………………… 1. 熱微菌屬 ( Thermomicrobium )

* B. 細胞小，寬度 0.4~0.8mm

* C. 能以葡萄糖為碳源生長

* D. 能在 pH4.5 生長 …………………………… 2. 熱酸菌屬 ( Acidothermus )

* DD. 不能在 pH4.5 生長 …………………………………… 3. 棲熱菌屬 ( Thermus )

* CC. 不能以葡萄糖為唯一碳源 ……………… 4. 棲熱嗜油菌屬 ( 棲熱嗜獅菌屬 Thermoleophilum )

* AA. 不能在 60 o C 以上生長

二、現(xiàn)代分類鑒定方法

* 近年來，隨著分子生物學的發(fā)展和各項新技術(shù)的廣泛應用，促使微生物分類鑒定工作有了飛速發(fā)展。

各種微生物的鑒別方法

首先如果你的菌株是自然界中分離得到，就只能鑒定到種，不能鑒定到株，因為多多少少和其他株系的細菌有區(qū)別，即便你做了一些特征的鑒定，發(fā)現(xiàn)和某一株細菌一模一樣，你也沒有理由說你的細菌就是那一株細菌，因為你不可能把所有的特征槐源都做完，株和株之間的關系就相當于不同的人之間的關系，世界上不可能有完全相同的兩個人。除非你知道你的細菌本來就是某一株細菌擴增出來的（而且要保證沒有變異，否則就是一個新株），可是這樣就沒必要鑒定了搏明擾。

菌種鑒定一般就只要提取基因組DNA，然后PCR擴增16srDNA片段，上GeneBank或者Eztaxon對比即可。一般序列相似度在97%以上就可以認為是同種細菌（當然也有例外，DNA序列僅僅基旦是一個參考指標）。

微生物菌種鑒定方法

【答案】：對于一株未知的細菌，首先要用經(jīng)典鑒定指標進行鑒定，包括形態(tài)、生理生化反應、生態(tài)特性、生活史、血清學反應以及對噬菌體的敏感性等。接著需要用現(xiàn)代的微生物學鑒定技術(shù)包括(G+C)mol%值法、核酸分子雜交法、16SrRNA寡核苷酸測序技術(shù)等手段對其進行分基沒析，最終確定手物該細菌屬于畢鋒液哪個種。